Из истории эпидемий:

News image

Холера, история эпидемий

Холера - древняя инфекция человека. Периодически она распространялась на многие страны мира и уносила миллионы человеческих жизн...

News image

Первая пандемия, РИМ, 541-590 гг

Миллионы людей умерли во время «Первой пандемии», названной «Чумой Юстиниана», которая распространилась по территории Римской им...

News image

Оспа, краткий исторический очерк

Оспа была описана еще за 4 тыс. лет до н.э. в египетском папирусе

News image

История эпидемий: от чумы до атипичной пневмонии

В мире постоянно свирепствуют несколько эпидемий. Наиболее известна из них эпидемия СПИДа. 42 млн. человек являются носителями э...

Диагностика заболеваний:

News image

Диагностика инфекционных заболеваний

При любой болезни очень важна ранняя диагностика, так как своевременное лечение всегда дает лучшие результаты. При инфекционных ...

News image

Ошибки в диагностике и лечении инфекционной патологии

Большинство заболеваний человека было описано еще в позапрошлом и прошлом столетиях. Все они имеют определенную клиническую карт...

News image

Мифы о диагностике: правда и домыслы

Миф первый. Существует универсальное исследование, позволяющее выявить любую патологию. Каждое исследование проводится с конк...

News image

Диагностика вирусных инфекций

В настоящее время широко применяются 4 способа диагностики вирусных инфекций: 1) выделение вируса в культуре клеток (наиболее...



Designed by:
SiteGround web hosting Joomla Templates



Достижения в лабораторной диагностике респираторных вирусных заболеваний
Инфекционные заболевания - Распространение заболеваний

достижения в лабораторной диагностике респираторных вирусных заболеваний

Вирусы, в первую очередь, инфицируют респираторный тракт человека, что может приводить ко многим различным клиническим проявлениям. Самыми распространёнными среди них являются инфекции верхних отделов дыхательных путей (ИВДП). Дети переносят от 6 до 9 ИВДП в год, и их количество снижается до 2-4 в подростковом возрасте и у взрослых. Инфекции нижних отделов дыхательных путей (ИНДП) встречаются значительно реже, но обходятся значительно дороже. Приблизительно одна треть детей переносят ИНДП в течение первого года жизни. Среди детей школьного возраста эта доля составляет 5-10%, у здоровых взрослых менее 5% и опять возрастает приблизительно до 17% у пожилых пациентов. Доля визитов в больницы в США как среди детей, так и взрослых с вирусными ИНДП весьма значительна. Группами высокого риска для вирусных ИНДП являются дети; иммунокомпрометированные пациенты; лица с хроническими заболеваниями (сердца, лёгких, почек и т.д.) а также пожилые люди; пациенты стационаров и военнослужащие.

Число детей, госпитализируемых каждый год в США с вирусными инфекциями нижних отделов дыхательных путей, недавно оценивалось как 200000 со специфическим диагнозом (когда установлена этиология заболевания) и ещё дополнительно 210000 с клиническим диагнозом. Стоимость же лечения оценивается почти в миллиард долларов США.

Хотя респираторные вирусные инфекции вызывают значительную заболеваемость и смертность, лабораторная диагностика нужна не для всех пациентов и не всегда. Необходима разработка специфических руководств по тому, когда оправдано использование лабораторных методов.

Многие вирусные инфекции вначале вызывают симптомы поражения респираторного тракта. Большинство респираторных вирусов проникают в организм через слизистую оболочку носа, глотки, трахеи и бронхов. Некоторые вирусы (например, SARS-ассоциированный коронавирус и некоторые виды аденовирусов) фактически могут проникать через гастроинтестинальный тракт, а затем распространяться с кровотоком в лёгкие. Самые распространённые респираторные вирусы включают в себя вирусы гриппа типа А и B, респираторно-синцитиальный вирус типы A и B, вирус парагриппа типы 1, 2 и 3, человеческий метапневмовирус, аденовирусы (субтипы от А до Е), риновирусы (многие субтипы), человеческие коронавирусы 229Е, ОС43 и коронавирус, вызывающий тяжёлый острый респираторный синдром (ТОРС).

У многих пациентов с инфекциями нижних отделов дыхательных путей, у которых проводится обследование с помощью лабораторных диагностических методик, получаются отрицательные результаты. Некоторыми факторами, приводящими к отрицательным лабораторным результатам, могут являться неидентифицируемые агенты (например, коронавирус, вызывающий SARS, человеческий метапневмовирус), низкая вирусная нагрузка и присутствие ингибиторов в клиническом образце, некачественный забор клинического материала и его обработка. В настоящее время известны следующие лабораторные методы, доступные для респираторных вирусов: культуральный, серологический, микроскопический (включая электронную микроскопию), непрямые и прямые иммунофлуоресцентные методы, иммуноферментный анализ, исследование активности ферментов (нейраминидазный тест), и амплификацию нуклеиновых кислот (например, полимеразная цепная реакция - ПЦР).

Культуральный метод используется как золотой стандарт, но в течение последних 10 лет постепенно заменяется молекулярными методами. Культивирование и в ближайшем будущем будет также оставаться важным методом для поддержания вирусных культур, используемых для анализа генетических и антигенных изменений в вирусных популяциях (например, ранняя вакцина против гриппа) и для открытия новых неизвестных вирусов (например человеческого метапневмовируса). Однако лабораторий, обладающих достаточными навыками и оборудованием для такой работы, становится все меньше из-за уменьшающейся потребности в таких исследованиях, следовательно, необходима организация региональных центров для проведения такой работы.

Серологические методы, как правило, не очень информативны в случае острой инфекции. Кроме того, от 10 до 30% пациентов с подтверждённой респираторной вирусной инфекцией являются серонегативными.

В настоящее время сильное развитие получили методики для экспресс-анализа. Вот уже более 30 лет используются антигенные тесты, которые включают в себя иммуноферментный анализ (ИФА). Значительно более молодыми являются оптический иммунный анализ и анализ нейраминидазной активности. Эти методы всё ещё широко используются, и основными их преимуществами являются дешевизна и простота. Однако они страдают от недостатка чувствительности и специфичности, особенно в специфических популяциях, таких как иммунокомпрометированные пациенты или пожилые люди. До тех пор, пока чувствительные и специфические методики не станут дешевле и проще, широко будут использоваться антигенные методики.

Молекулярно-биологические методы стали в настоящее время стандартами для определения вирусных агентов. Опубликованные данные о чувствительности таких методов обычно приближаются к 100%, фактически проведённые исследования показывают значительное превышение параметров чувствительности по сравнению со стандартными методиками (до 30%). Однако в настоящее время для диагностики распространённых респираторных вирусов не существует методик, одобренных FDA. Большинство молекулярных методов основаны на ПЦР. Существуют также и работы, использующие NASBA.

Самой старой и широко распространённой молекулярной коммерческой методикой является Hexaplex на основе мультиплексной ПЦР для определения семи разных наиболее распространённых респираторных вирусов. Результаты мультиплексной ПЦР демонстрируют очень тесную корреляцию с методом бляшкообразования, но ПЦР гораздо более чувствительна.

Другим молекулярно-биологическим методом является ПЦР в реальном времени. Она включает в себя меньшее количество этапов, пониженный риск контаминации, которая является потенциальной проблемой большинства молекулярных методов. Дополнительным преимуществом по сравнению с ПЦР стандартного формата также является высокая скорость проведения анализа. К минусам следует отнести высокую стоимость оборудования, реагентов, трудности в установке значений «серой» зоны при низкой вирусной нагрузке, нестабильность при хранении коммерческих реагентов и невозможность одновременного определения более чем 3-4 агентов.

В настоящее время в академических институтах, коммерческих и военных лабораториях проводится очень большая работа по разработке методик для определения респираторных вирусов. Эта работа подстегивается угрозой биотерроризма. Эпидемия SARS и перспектива пандемий гриппа мотивируют многие компании для развития технологий, которые позволяют быструю идентификацию известных и неизвестных респираторных патогенов. Некоторые из этих методов, которые только разрабатываются, будут позволять проводить определение возбудителя в течение одного часа, хотя и не понятно, насколько дорогим будет оборудование для использования таких методов. Вот некоторые из подобных устройств:

¾ капиллярный электрофорез с или без мультиплексной ПЦР;

¾ биочипы с или без мультиплексной ПЦР;

¾ портативные устройства для проведения ПЦР с обратной транскрипцией;

¾ полностью оснащённые портативные молекулярные лаборатории, использующие ПЦР или ПЦР в реальном времени без жидких компонентов до внесения образца;

¾ мультиплексные ПЦР в полностью автоматических аппаратах без нужды в выделении ДНК/РНК;

¾ мультиплексная ПЦР с помощью микрогранул.

Хотя будущее диагностики респираторных вирусов выглядит довольно определённо, необходимо учитывать следующие потенциально важные особенности молекулярной диагностики:

· стоимость реагентов, аппаратуры, требуемых для данной диагностики;

· необходимость надёжных коммерческих реагентов;

· необходимость наличия открытых платформ, которые могут быть использованы для определения вновь появляющихся агентов;

· наличие контрольных панелей для контроля работы и обмена информацией между лабораториями.

 


Читайте:


Добавить комментарий


Защитный код
Обновить

Профилактические мероприятия:

Цена на асептику

News image

Стерильность всех инструментов зависит исключительно от умело накрытого стерильного стола. Как накрыть стерильный стол максимально...

Сайт проверок Роспотребнадзора

News image

На сегодняшний день в России осуществляет работу государственный контролирующий орган — Роспотребнадзор. Это относительно новый го...

Мытьё рук и использование масок помогает предотвратить распространение

News image

Согласно результатам Кокрановского обзора такие простые меры, как мытьё рук и использование масок, являются эффективным барьером...

Режимы стерилизации

News image

Для обеззараживания медицинских изделий, что подразумевает гибель микроорганизмов, применяется стерилизация, где наибольшую э...

Режимы дезинфекции

News image

Во время определенных инфекционных заболеваний используют особые режимы дезинфекции изделий медицинского назначения и подбираются ...

Способы уничтожения клопов

News image

Клопы могут появиться в жилом помещении и докучать всем членам семьи. Питаясь человеческой кровью, они оставляют укусы на теле. Жи...

Авторизация