Из истории эпидемий:

News image

СПИД. Первые исследования

СПИД Священники нарекли его предвестником Апокалипсиса, врачи же называли «иммунодефицитом гомосексуалистов». С его возникнов...

News image

История эпидемий в России XIV столетия

Историю эпидемий четырнадцатого века открыла пандемия, сочетавшаяся с эпизоотией и вызвавшая голод, во всей русской земле, в 130...

News image

Грозят ли миру неоэпидемии?

Всемирная организация здравоохранения обнародовала очередной ежегодный доклад, в котором основной акцент сделан на новых заболев...

News image

Легочная чума в свете исторических источников

Первое исторически зафиксированное появление легочной чумы Вопреки существующим сегодня представлениям, что легочные осложнен...

Диагностика заболеваний:

News image

Иммунологические методы диагностики инфекционных заболеваний

I. Иммунный ответ при инфекционных заболеваниях. Иммунный ответ — это реакция на чужеродный антиген, которая приводит к накоплен...

News image

ВИДЫ ЭКСПРЕСС ТЕСТОВ И СПОСОБЫ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

Классические иммуноферментные тест-системы  выпускаются в виде готовых к применению комплектов с набором реагентов, для проведен...

News image

Диагностика инфекционных заболеваний

При любой болезни очень важна ранняя диагностика, так как своевременное лечение всегда дает лучшие результаты. При инфекционных ...

News image

Диагностика грибковых инфекций

Диагноз грибковых инфекций основан на выделении возбудителя в посевах крови или биоптатов тканей. Грибковые инфекции часто возни...



Designed by:
SiteGround web hosting Joomla Templates
Санитарно-эпидемиологические службы России, Powered by Joomla! and designed by SiteGround


Достижения в лабораторной диагностике респираторных вирусных заболеваний
Инфекционные заболевания - Распространение заболеваний

достижения в лабораторной диагностике респираторных вирусных заболеваний

Вирусы, в первую очередь, инфицируют респираторный тракт человека, что может приводить ко многим различным клиническим проявлениям. Самыми распространёнными среди них являются инфекции верхних отделов дыхательных путей (ИВДП). Дети переносят от 6 до 9 ИВДП в год, и их количество снижается до 2-4 в подростковом возрасте и у взрослых. Инфекции нижних отделов дыхательных путей (ИНДП) встречаются значительно реже, но обходятся значительно дороже. Приблизительно одна треть детей переносят ИНДП в течение первого года жизни. Среди детей школьного возраста эта доля составляет 5-10%, у здоровых взрослых менее 5% и опять возрастает приблизительно до 17% у пожилых пациентов. Доля визитов в больницы в США как среди детей, так и взрослых с вирусными ИНДП весьма значительна. Группами высокого риска для вирусных ИНДП являются дети; иммунокомпрометированные пациенты; лица с хроническими заболеваниями (сердца, лёгких, почек и т.д.) а также пожилые люди; пациенты стационаров и военнослужащие.

Число детей, госпитализируемых каждый год в США с вирусными инфекциями нижних отделов дыхательных путей, недавно оценивалось как 200000 со специфическим диагнозом (когда установлена этиология заболевания) и ещё дополнительно 210000 с клиническим диагнозом. Стоимость же лечения оценивается почти в миллиард долларов США.

Хотя респираторные вирусные инфекции вызывают значительную заболеваемость и смертность, лабораторная диагностика нужна не для всех пациентов и не всегда. Необходима разработка специфических руководств по тому, когда оправдано использование лабораторных методов.

Многие вирусные инфекции вначале вызывают симптомы поражения респираторного тракта. Большинство респираторных вирусов проникают в организм через слизистую оболочку носа, глотки, трахеи и бронхов. Некоторые вирусы (например, SARS-ассоциированный коронавирус и некоторые виды аденовирусов) фактически могут проникать через гастроинтестинальный тракт, а затем распространяться с кровотоком в лёгкие. Самые распространённые респираторные вирусы включают в себя вирусы гриппа типа А и B, респираторно-синцитиальный вирус типы A и B, вирус парагриппа типы 1, 2 и 3, человеческий метапневмовирус, аденовирусы (субтипы от А до Е), риновирусы (многие субтипы), человеческие коронавирусы 229Е, ОС43 и коронавирус, вызывающий тяжёлый острый респираторный синдром (ТОРС).

У многих пациентов с инфекциями нижних отделов дыхательных путей, у которых проводится обследование с помощью лабораторных диагностических методик, получаются отрицательные результаты. Некоторыми факторами, приводящими к отрицательным лабораторным результатам, могут являться неидентифицируемые агенты (например, коронавирус, вызывающий SARS, человеческий метапневмовирус), низкая вирусная нагрузка и присутствие ингибиторов в клиническом образце, некачественный забор клинического материала и его обработка. В настоящее время известны следующие лабораторные методы, доступные для респираторных вирусов: культуральный, серологический, микроскопический (включая электронную микроскопию), непрямые и прямые иммунофлуоресцентные методы, иммуноферментный анализ, исследование активности ферментов (нейраминидазный тест), и амплификацию нуклеиновых кислот (например, полимеразная цепная реакция - ПЦР).

Культуральный метод используется как золотой стандарт, но в течение последних 10 лет постепенно заменяется молекулярными методами. Культивирование и в ближайшем будущем будет также оставаться важным методом для поддержания вирусных культур, используемых для анализа генетических и антигенных изменений в вирусных популяциях (например, ранняя вакцина против гриппа) и для открытия новых неизвестных вирусов (например человеческого метапневмовируса). Однако лабораторий, обладающих достаточными навыками и оборудованием для такой работы, становится все меньше из-за уменьшающейся потребности в таких исследованиях, следовательно, необходима организация региональных центров для проведения такой работы.

Серологические методы, как правило, не очень информативны в случае острой инфекции. Кроме того, от 10 до 30% пациентов с подтверждённой респираторной вирусной инфекцией являются серонегативными.

В настоящее время сильное развитие получили методики для экспресс-анализа. Вот уже более 30 лет используются антигенные тесты, которые включают в себя иммуноферментный анализ (ИФА). Значительно более молодыми являются оптический иммунный анализ и анализ нейраминидазной активности. Эти методы всё ещё широко используются, и основными их преимуществами являются дешевизна и простота. Однако они страдают от недостатка чувствительности и специфичности, особенно в специфических популяциях, таких как иммунокомпрометированные пациенты или пожилые люди. До тех пор, пока чувствительные и специфические методики не станут дешевле и проще, широко будут использоваться антигенные методики.

Молекулярно-биологические методы стали в настоящее время стандартами для определения вирусных агентов. Опубликованные данные о чувствительности таких методов обычно приближаются к 100%, фактически проведённые исследования показывают значительное превышение параметров чувствительности по сравнению со стандартными методиками (до 30%). Однако в настоящее время для диагностики распространённых респираторных вирусов не существует методик, одобренных FDA. Большинство молекулярных методов основаны на ПЦР. Существуют также и работы, использующие NASBA.

Самой старой и широко распространённой молекулярной коммерческой методикой является Hexaplex на основе мультиплексной ПЦР для определения семи разных наиболее распространённых респираторных вирусов. Результаты мультиплексной ПЦР демонстрируют очень тесную корреляцию с методом бляшкообразования, но ПЦР гораздо более чувствительна.

Другим молекулярно-биологическим методом является ПЦР в реальном времени. Она включает в себя меньшее количество этапов, пониженный риск контаминации, которая является потенциальной проблемой большинства молекулярных методов. Дополнительным преимуществом по сравнению с ПЦР стандартного формата также является высокая скорость проведения анализа. К минусам следует отнести высокую стоимость оборудования, реагентов, трудности в установке значений «серой» зоны при низкой вирусной нагрузке, нестабильность при хранении коммерческих реагентов и невозможность одновременного определения более чем 3-4 агентов.

В настоящее время в академических институтах, коммерческих и военных лабораториях проводится очень большая работа по разработке методик для определения респираторных вирусов. Эта работа подстегивается угрозой биотерроризма. Эпидемия SARS и перспектива пандемий гриппа мотивируют многие компании для развития технологий, которые позволяют быструю идентификацию известных и неизвестных респираторных патогенов. Некоторые из этих методов, которые только разрабатываются, будут позволять проводить определение возбудителя в течение одного часа, хотя и не понятно, насколько дорогим будет оборудование для использования таких методов. Вот некоторые из подобных устройств:

¾ капиллярный электрофорез с или без мультиплексной ПЦР;

¾ биочипы с или без мультиплексной ПЦР;

¾ портативные устройства для проведения ПЦР с обратной транскрипцией;

¾ полностью оснащённые портативные молекулярные лаборатории, использующие ПЦР или ПЦР в реальном времени без жидких компонентов до внесения образца;

¾ мультиплексные ПЦР в полностью автоматических аппаратах без нужды в выделении ДНК/РНК;

¾ мультиплексная ПЦР с помощью микрогранул.

Хотя будущее диагностики респираторных вирусов выглядит довольно определённо, необходимо учитывать следующие потенциально важные особенности молекулярной диагностики:

· стоимость реагентов, аппаратуры, требуемых для данной диагностики;

· необходимость надёжных коммерческих реагентов;

· необходимость наличия открытых платформ, которые могут быть использованы для определения вновь появляющихся агентов;

· наличие контрольных панелей для контроля работы и обмена информацией между лабораториями.

 


Читайте:


Добавить комментарий


Защитный код
Обновить

Профилактические мероприятия:

Приборы для проведения дезинфекции

News image

Качество и эффективность дезинфекции при применении растворов химических дезинфицирующих средств во многом зависит от обеспечени...

Уничтожение крыс в домах

News image

Бороться с крысами - дело непростое. И окончательного победителя в этой борьбе пока нет. Ведь, какие бы средства не изобретал чело...

Уничтожение крыс своими руками

News image

С наступлением зимы грызуны переходят в наступление. В холодное время года эти маленькие создания могут принести большие проблемы ...

Дератизация помещений

News image

Сегодня разведение и содержание рогатого скота, домашних кроликов, птиц, свиней, и прочих животных, является достаточно выгодным и...

Профилактика свиного гриппа

News image

Профилактика свиного гриппа дома Часто мойте руки Мойте свои руки водой с мылом на протяжении 20 секунд (за это время Вы ...

Профилактика бешенства животных и человека

News image

1. Руководители животноводческих хозяйств, предприятий, учреждений, организаций и граждане-владельцы животных обязаны: - собл...

Авторизация